Abstrakt
Východisko. Mnohopočetný myelóm (MM) je druhá najčastejšia hematologická malignita. Bortezomibom indukovaná periférna neuropatia (BIPN) je častou komplikáciou liečby MM, ktorá môže by bez adekvátnej liečby invalidizujúca až paralyzujúca. U pacientov s MM je dobre opísaná interindividuálna variabilita citlivosti na toxicitu bortezomibu a rozvoj neuropatie. Úloha genetických polymorfizmov v tejto variabilite nie je dostatočne objasnená. Hlavným cieľom našej štúdie bola aplikácia modernej metódy pre detekciu vybraných jednonukleotidových genetických polymorfizmov s možnou asociáciou s BIPN.

Súbor a metódy. Analyzovali sme skupinu 65 pacientov s mnohopočetným myelómom (MM) liečených liečbou obsahujúcou bortezomib. Kontrolná skupina pozostávala z 10 zdravých probandov. Na analýzu boli navrhnuté špecifické extenzné oligonukleotidové primery pre amplifikáciu vybraných génových oblastí použitím SNaPshot metódy. Polymorfizmy CTLA4 rs4553808, CTSS rs12568757, DYNC1 rs916758 a CASP9 rs4646091 boli testované v samostatných aj multiplexných reakciách komerčným kitom SNaPshot Multiplex kit (Applied Biosystems). 
Výsledky. Vo vyšetrenom súbore 65 pacientov (30 mužov a 35 žien) boli zistené príznaky periférnej neuropatie u 46/65 (71 %) a bez príznakov bolo 19/65 (29 %) z nich. Okrem molekulovo genetickej analýzy zameranej na detekciu kandidátnych SNP bol detegovaný typ a reazec monoklonového paraproteínu. V kostnej dreni bolo stanovené zastúpenie plazmatických buniek a pacientov bolo určené štádium podľa Salmon Durie klasifikácie. Zároveň bola zhodnotená liečebná odpoveď a štádium vzniknutej periférnej neuropatie. V skupinách pacientov s príznakmi a bez príznakov PN neboli zistené štatisticky významné rozdiely v porovnaní s kontrolnou skupinou 10 probandov. 
Záver. Detekcia jednonukleotidových polymorfizmov (SNP) v kandidátnych génoch použitím moderných molekulovogenetických metód zostáva perspektívnym nástrojom na predikciu neurotoxicity liečby a môže v budúcnosti prispie aj k cielenej personalizovanej terapeutickej intervencii. Naše výsledky nepotvrdili asociáciu medzi kandidátnymi SNP v génoch CTLA4, CASP9, CTSS, DYNC1/1 a periférnou neuropatiou vyvolanou bortezomibom v slovenskej populácii. Na overenie genetických polymorfizmov, ktoré môžu zvyšova riziko BIPN, sú potrebné asociačné štúdie s väčším počtom pacientov s myelómom liečených bortezomibom (tab. 3, obr. 2, lit. 26). Text v PDF www.lekarskyobzor.sk.

KĽÚČOVÉ SLOVÁ: mnohopočetný myelóm, bortezomib, periférna neuropatia, genotypizácia, genetické polymorfizmy.
Lek Obz 2023, 72 (8): 352-358 

Association of single nucleotide genetic polymorphisms with bortezomib-induced peripheral neuropathy in multiple myeloma patients

Abstract
Background. Multiple myeloma (MM) is the second most common haematological malignancy. Bortezomib-induced peripheral neuropathy (BIPN) is a common complication of MM patients therapy, which can lead without treatment to progressive disability and paralysis. Interindividual variability in susceptibility to bortezomib toxicity and the development of neuropathy is well described in MM patients. The role of genetic polymorphisms in BIPN is not fully understood. The main objective of our study was to apply a modern molecular method for the detection of selected single nucleotide genetic polymorphisms potentially associated with BIPN.
Patients and Methods. We analyzed the study group of 65 patients with MM treated with bortezomib-containing therapy with and without symptoms of peripheral neuropathy. The control group consisted of 10 healthy individuals. Specific oligonucleotide extension primers were designed for amplification of selected gene regions using the SNaPshot method. Polymorphisms CTLA4 rs4553808, CTSS rs12568757, DYNC1 rs916758 and CASP9 rs4646091 were tested in single and multiplex reactions with the commercial SNaPshot Multiplex kit (Applied Biosystems).
Results. From 65 patients involved in the study (30 men and 35 women), in 46/65 (71 %) were found clinical manifestationof peripheral neuropathy. Only 19/65 (29 %) of MM patients were asymptomatic after therapy with bortezomib. In addition to molecular - genetic analysis aimed at detecting candidate SNPs, the type and chain of monoclonal paraprotein was detected. Plasma cell representation was determined in the bone marrow and patients were staged according to the Salmon Durie classification. At the same time, the treatment response and the stage of the resulting peripheral neuropathy were evaluated. There were no statistically significant differences in the groups of patients with and without symptoms of PN compared to the control group . Our results did not confirmed the association between four selected candidate SNPs and symptomatic BIPN.
Conclusions. Detection of single nucleotide polymorphisms (SNPs) in candidate genes using modern molecular - genetic methods remains a promising tool to predict neurotoxicity of treatments and may also contribute to targeted personalized therapeutic intervention in the future. Our results did not confirm association SNP in genes CTLA4, CASP9, CTSS, DYNC1/1 and symptomatic bortezomib-induced peripheral neuropathy in the Slovak population. There is still a need to validate genetic polymorphisms that may increase the risk of BIPN using association studies with a larger number of myeloma patients treated with bortezomib (Tab. 3, Fig. 2, Ref. 26). Text in PDF www.lekarskyobzor.sk.
KEY WORDS: multiple myeloma, bortezomib, peripheral neuropathy, genotyping. 

Lek Obz 2023, 72 (8): 352-358 

Lucia TATAYOVÁ 1,2, Renáta LUKAČKOVÁ 1, Ľubica HARVANOVÁ 3, Beáta MLADOSIEVIČOVÁ 2

1 Oddelenie lekárskej genetiky, Medirex, a.s., Bratislava
2 Oddelenie klinickej patofyziológie, Lekárska fakulta, Univerzita Komenského, Bratislava, vedúca prof. MUDr. B. Mladosievičová, CSc.
3 Klinika hematológie a transfuziológie, Univerzitná nemocnica, Lekárska fakulta Univerzity Komenského, Bratislava a Slovenská zdravotnícka univerzita, Bratislava, prednostka prof. MUDr. A. Bátorová, PhD.

CITE
TATAYOVÁ L., LUKAČKOVÁ R., HARVANOVÁ Ľ. a kol.: Asociácia jednonukleotidových genetických polymorfizmov s periférnou neuropatiou u pacientov s mnohopočetným myelómom po liečbe bortezomibom. Lek Obz 2023, 72 (8): 352-358