Abstrakt
Východiská. Kultivácia buniek vo forme 3D sféroidov vytvára mikroprostredie bližšie in vivo podmienkam v porovnaní s konvenčnými 2D monovrstvami. Spôsoby ich prípravy sa neustále zdokonaľujú s cieľom dosiahnu konzistentné a funkčne relevantné štruktúry. 

Súbor a metódy. V tejto štúdii porovnávame platformy „hanging-drop“ a 96-jamkové ultranízkoadhézne platne s guľatým dnom, v prítomnosti aj neprítomnosti 0,24 % metylcelulózy (MC), pri líniách pankreatického duktálneho adenokarcinómu (PDAC) PANC-1, PaTu-8902, MIAPaCa-2 a Capan-2. 
Výsledky. Línie PANC-1 a PaTu-8902 tvorili kompaktné, morfologicky stabilné sféroidy, kým MIAPaCa-2 a Capan-2 vytvárali voľné bunkové agregáty s nízkou kompaktnosou. Stanovili sme optimálnu hustotu nasadenia (500 – 1000 buniek/jamka), pri ktorej priemer sféroidov počas experimentu nepresiahol veľkos 500 µm, čo je hodnota spájaná s rozvojom centrálnej nekrózy. Pridaním MC sme dosiahli zvýšenie viskozity média, čo viedlo k zníženiu adhézie buniek k povrchu jamiek a podporilo medzibunkové interakcie; výsledkom bol ostrejšie definovaný okraj a vyššia cirkularita sféroidov. 
Závery. Metódou „hanging-drop“ sme vytvorili kompaktné sféroidy (PANC-1 a PaTu-8902), z hľadiska rutinného použitia je však táto platforma náročnejšia na manipuláciu, výmenu média a následné testovanie látok. Odporúčame štandardizovaný protokol (~500 – 1000 buniek/jamka; 0,24 % MC) ako praktický základ pre fenotypový a farmakologický skríning PDAC ( lit. 9). Text v PDF www.lekarskyobzor.sk.
KĽÚČOVÉ SLOVÁ: 3D model, PDAC, metylcelulóza, ultranízkoadhézne platne, „hanging-drop“. 
Lek Obz 2026, 75 (1): 34-38

Standardization of spheroid formation from pancreatic ductal adenocarcinoma cells

Abstract
Background. Three-dimensional (3D) spheroid culture more accurately mimics the in vivo tumor microenvironment compared with conventional two-dimensional monolayers. 
Sample and Methods. Hanging-drop and 96-well ultra–low-attachment (round-bottom) platforms, with or without the addition of 0.24% methylcellulose (MC), were evaluated using pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) cell lines PANC-1, PaTu-8902, MIAPaCa-2, and Capan-2. 
Results. PANC-1 and PaTu-8902 formed compact, morphologically stable spheroids, whereas MIAPaCa-2 and Capan-2 were aggregating without generating a compact spheroid. A seeding density of 500–1,000 cells per well maintained spheroid diameters 500 µm throughout cultivation, a threshold commonly associated with the onset of central necrosis. The addition of MC increased medium viscosity, reduced cell adhesion to well surfaces, and facilitated intercellular cohesion, which translated into improved spheroid compactness and circularity. Although hanging-drop culture yielded compact spheroids (PANC-1, PaTu-8902), it was less practical for routine workflows due to challenging medium exchange and compound dosing. Conclusions. Accordingly, we recommend a standardized protocol (500–1,000 cells/well; 0.24% MC) in 96-well ultra–low-attachment round-bottom plates as a practical, reproducible foundation for phenotypic and pharmacological screening in PDAC models (Ref. 9). Text in PDF www.lekarskyobzor.sk.
KEY WORDS: 3D model; PDAC; methylcellulose; ultra-low-attachment plates; hanging-drop.
Lek Obz 2026, 75 (1): 34-38

Lenka VARINSKÁ 1, Jana SABOVÁ 1, Matúš ČOMA 1,2

1 Ústav farmakológie, Lekárska fakulta, Univerzita P.J. Šafárika, Košice, prednosta prof. MVDr. J. Mojžiš, DrSc.
2 Referát pre biomedicínsky výskum, Východoslovenský ústav srdcových a cievnych chorôb, a. s., Košice, referent špecialista RNDr. P. Gál, DrSc., MBA